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实验技术与服务

细胞划痕愈合实验

细胞划痕愈合实验

细胞划痕实验是测定肿瘤细胞运动特性和细胞迁移的体外实验方法。其基本原理是将细胞培养在培养皿或平板上,待细胞融合成单层状态时用工具刮在中央区域画一条线,线内的细胞将被机械力去除,从而制造出暂时无细胞生长的空白区域,换取培养基后将细胞继续培养,间隔一定时间观察细胞向无细胞的空白区迁移的情况,来判断细胞的迁移能力。
Transwell迁移/侵袭

Transwell迁移/侵袭

评估细胞迁移和侵袭能力常使用Transwell实验方法,为真实模拟细胞迁移和侵袭的环境,对细胞迁移和侵袭等各方面进行研究,通常使用不同孔径透明质膜孔板模拟体内环境。 Transwell小室分为上室和下室,上室盛装上层培养液;下室盛装下层培养液。上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,以此研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
克隆形成实验

克隆形成实验

单个细胞的持续增长会增加细胞数量,持续增殖6代以上的细胞群体成为克隆或集落,顺利获得观察单细胞集落形成情况,来计算克隆形成率,得知其增殖能力。细胞培养环境中的理化因素的变化,可能导致细胞的克隆形成能力发生改变,故可使用平板克隆的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。
细胞衰老染色

细胞衰老染色

细胞衰老染色是一种用于检测细胞衰老的实验技术,常用的染色方法SA-β-gal染色。A-β-gal染色是利用酶活性来检测细胞衰老,衰老细胞中,β-半乳糖苷酶的活性显著增加,尤其在pH 6.0的环境下。SA-β-gal染色法顺利获得底物(如X-gal)与β-半乳糖苷酶反应,产生蓝色沉淀,从而标识衰老细胞。SA-β-gal不依赖于DNA复制,可以区分衰老细胞与静止期的细胞。
免疫荧光染色

免疫荧光染色

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)又称荧光抗体技术,基本反应是抗原-抗体反应。当抗原抗体发生反应时,就可进行组织或细胞内抗原物质的定位,而免疫荧光技术可以在不影响抗原抗体活性的基础上,将荧光素标记在抗体/抗原上,用荧光显微镜检测或定位其荧光反应位点。
PI/Calcein AM双染

PI/Calcein AM双染

PI/Calcein AM双染是一种常用的细胞活性检测技术,广泛应用于细胞生物学研究。Calcein-AM的疏水性较强可直接穿透活细胞的细胞膜,因被细胞内的酯酶水解成(钙黄绿素),结果会产生绿色荧光。PI是不可顺利获得活细胞的细胞膜,但可进入凋亡细胞和死细胞的细胞核,从而产生红色荧光。因此可用PI/Calcein AM双染法来区分活细胞和死细胞,从而对细胞毒性/细胞活性/细胞凋亡进行检测。
ROS活性氧检测

ROS活性氧检测

活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit,也称ROS Assay Kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以定量分析细胞内活性氧的水平。
免疫沉淀(IP)

免疫沉淀(IP)

免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)是一种经典的实验技术,用于从复杂的生物样本中分离和富集特定的蛋白质及其相互作用伙伴。该技术广泛应用于蛋白质相互作用、蛋白翻译后修饰研究。免疫沉淀利用特异性抗体与目标蛋白质结合,从而形成抗体-抗原复合物。顺利获得沉淀这些复合物,可以将目标蛋白质从其他蛋白质中分离出来。而后用于对蛋白复合物形成机理,蛋白翻译后修饰机制的探索和诊断标志物的发现。
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